自闭症患儿肠道菌群变化及其与自闭症分级的关系

成霞，袁伯稳

海安人民医院儿科，江苏226611

【摘要】：目的分析自闭症患儿肠道菌群的变化及其与疾病发展的关系。方法选择2018年6月至2019年6月我院收治的134例自闭症患儿为观察组，根据美国精神疾病分类与诊断标准(第5版)将自闭症患儿按病情严重程度分为一级组(51例)、二级组(47例)、三级组(36例)。选择同期于我院进行体检的50例健康儿童为对照组。比较各组儿童胃肠道症状和肠道菌群分布情况，釆用Spearman相关性分析自闭症患儿病情分级与肠道菌群关系。结果对照组、一级组、二级组、三级组儿童胃肠道症状发生率依次上升(均P<0.05)。对照组、一级组、二级组、三级组儿童肠道双歧杆菌数量依次下降，而梭状芽抱杆菌、大肠埃希菌、拟杆菌、志贺菌数量依次上升(均PC0.05)。自闭症患儿肠道双歧杆菌数量与自闭症分级呈负相关3=—0.746,P<0.001),梭状芽泡杆菌、大肠埃希菌、拟杆菌、志贺菌数量与自闭症分级呈正相关0=0.811、0.659、0.744、0.760,均P<0.001)。结论自闭症患儿胃肠道疾病发生率较高，自闭症分级与肠道菌群分布情况具有显著相关性。

【关键词】：自闭症；肠道菌群；差异性；相关性

中图分类号：R72文献标识码：A文章编号：1005-376X(2021)05-0560-04

DOI编码:10.13381/j.cnki.cjm.202105013

作者简介：成霞(199O-),女，本科，住院医师，从事儿科疾病治疗，

通信作者：袁伯稳(1968-),男，本科，主任医师，从事小儿神经系统疾病，新生儿疾病科疑难杂症研究，

前言

自闭症又叫孤独症，以社交、非语言、语言沟通困难以及刻板兴趣、行为、活动为主要特征。自闭症发病机制尚不完全清楚，临床认为.可能与遗传、神经生化、免疫、孕产期暴露于危险因素等有关，临床缺乏有效的针对性治疗手段。报道指出⑴，人体肠道存在大量微生物，包括细菌、真菌等，在肠道微环境中按照一定比例形成动态平衡，当菌群失衡时，机体出现胃肠道疾病症状，同时胃肠道微生物可通过脑一肠轴作用于中枢神经系统，影响情绪、认知功能⑵。随着对自闭症的认识进一步加深，临床发现大部分自闭症患者存在胃肠道疾病症状，故部分学者认为自闭症的发生发展可能与胃肠道菌群有关但目前关于自闭症患儿肠道菌群分布情况的报道较少。本研究对我院收治的自闭症患儿进行分析，探讨自闭症患儿肠道菌群差异与疾病发生发展的关系。

1对象与方法

1.1一般资料选择2018年6月至2019年6月我院收治的134例自闭症患儿为观察组，根据第5版美国精神疾病分类与诊断标准按自闭症患儿病情严重程度将患儿进一步分为一级组（51例）、二级组（47例）、三级组（36例）。选择同期于我院体检的50例儿童为对照组。患儿诊断标准参照《儿童孤独症诊疗康复指南》⑷。纳入标准：（1）年龄2〜10岁；（2）未经任何自闭症相关治疗。排除标准：（1）合并其他发育性疾病；（2）合并感染性疾病;（3）合并严重肝、肾功能障碍，胃肠道疾病，血液、免疫系统疾病或恶性肿瘤者；（4）入院检査发现粪便异常者；（5）患儿家属无法沟通者；（6）近一个月有益生菌及抗菌药物服用史者。对照组儿童中男性27例，女性23、例；年龄2〜9岁，平均年龄（7.33士1.49）岁。一级组中男性29例，女性22例;年龄3~10岁，平均年龄（7.40±1.51）岁；病程1〜10个月，平均病程（5.27士2.08）个月。二级组中男性26例，女性21例；年龄3〜9岁，平均年龄（7.36士1.54）岁;病程2〜10个月，平均病程（5.39+2.11）个月。三级组中男性21例，女性15例；年龄3〜9岁，平均年龄（7.44±1.53）岁；病程2〜11个月，平均病程（5.50士2.24）个月。4组儿童性别、年龄比较差异无统计学意义（寸=0.185、F=0.980,F=0.040,P=0.988）,具有可比性。本研究经医学伦理委员会批准，所有患儿家属签署知情同意书。

1.2肠道菌群检测收集两组患儿入院后首次粪便0.5g,样品保存于冷冻管液氮中，采用德国Qia-genGmbh公司生产的QIAampFastDNAStoolMiniKit（50）试剂盒提取DNA,将DNA提取液保存于一70°C冰箱中，标本送往华大基因检测中心进行检测，获得双歧杆菌、梭状芽泡杆菌、大肠埃希菌、拟杆菌、志贺菌的相对数量。比较对照组儿童与不同分级自闭症患儿肠道菌群分布情况。釆用Spearman相关性分析自闭症患儿肠道菌群与病情分级的关系。

1.3胃肠道症状观察记录并比较各组儿童胃肠道疾病症状情况，如恶心呕吐、腹泻等。胃肠道症状发生率=胃肠道症状发生例数/总例数X100%。

1.4统计学方法釆用SPSS20.0软件进行统计分析，正态分布的连续变量以均值士标准差（三士。表示，多组间比较计量资料釆用单因素方差分析，两两比较采用SNK-q检验，相关性分析采用Spearman分析。检验水准a=0.05。

2结果

2.1各组儿童胃肠道症状比较对照组、一级组、二级组、三级组儿童胃肠道症状发生率依次呈上升趋势，且两两比较差异均有统计学意义（均P<0.05）,见表1。表1各组儿童胃肠道症状比较］n（%）］

2.2各组儿童肠道菌群比较对照组、一级组、二级组、三级组儿童肠道双歧杆菌数量依次呈下降趋势，而梭状芽抱杆菌、大肠埃希菌、拟杆菌、志(均F<0.05),见表2。贺菌数量依次呈上升趋势，差异均有统计学意义，表2各组儿童肠道菌群比较2.3自闭症患儿肠道菌群与病情分级的相关性结果显示，自闭症患儿肠道双歧杆菌数量与自闭症分级呈负相关(r=-0.746,F<0.001),梭状芽抱杆菌、大肠埃希菌、拟杆菌、志贺菌水平与自闭症分级呈正相关(r=0.811,0.659、0.744、0.760,均P<0.001)。见表3。表3自闭症患儿肠道菌群与病情分级的相关性3.1自闭症的临床研究儿童自闭症是儿童广泛性发育障碍中最常见疾病之一，临床主要表现为语言障碍、社交障碍以及重复刻板行为，同时可伴随知觉、感觉、智力异常、多动、兴趣单调、•自伤行为等特征關。自闭症发病机制目前尚未完全清楚。部分学者认为，孤独障碍的遗传度可高达93%,多基因遗传可能起到致病作用。有研究发现⑺，部分自闭症患儿外周血5-羟色胺水平异常升高，并认为其齿状核一丘脑一皮质通路存在显著5-羟色胺合成异常，导致儿童大脑发育受影响而发病「句。相关报道显示，自闭症患儿往往合并精神发育迟滞、癫痫等症状，通过磁共振检査发现自闭症患儿存在额叶、海马血流灌注异常、小脑蒲肯野氏细胞萎缩弱。因此认为自闭症发病也可能与脑神经异常有关。除此之外，免疫因素、孕产期危险因素暴露等也是研究热点，但均未得到一致性验证。临床数据显示，我国自闭症患儿数量快速增长，患病率约为1/88"］。但目前临床缺乏自闭症的有效治疗手段，当前治疗方式主要包括教育、训练结合药物，但大多数患儿社会功能受损明显，预后较差，给患儿家属及社会造成较重负担。

3.2自闭症与胃肠道症状自闭症患儿与胃肠道疾病症状之间的关系研究较多，结论虽不完全一致,但大多数报道认为两者间具有一定相关性。国内研究显示，自闭症患儿以慢性便秘及腹泻等胃肠道症状最为显著口句。国外学者通过Meta分析发现，自闭症患儿粪便恶臭、便秘发生率明显高于健康儿童，并分析认为肠道气体物质是反应机体神经、行为的重要指标，粪便恶臭在一定程度上反映了机体状况但这些报道研究主要针对2〜7岁自闭症患儿，对更大年龄范围自闭症患儿的研究报道较少。本研究中，对照组、一级组、二级组、三级组儿童胃肠道疾病症状发生率依次呈上升趋势，可知自闭症患儿胃肠道疾病症状发生率明显高于健康儿童，与相关报道一致；同时自闭症分级越高，病情越严重，患儿胃肠道疾病症状发生率越高，表明胃肠道症状可能与自闭症患儿病情发生、发展有一定关联。3.3自闭症卢肠道菌群人体肠道中有大量不同种类的菌群与人体共生，相互依存，形成平衡而复杂的微生态系统，在人体营养吸收、食物消化、抵御致病菌侵入、免疫等方面发挥重要作用3七肠道菌群在平衡状态下不会伤害机体功能，一旦平衡被打破，肠道菌群失调，将对肠道功能产生负面影响，干扰机体代谢、免疫功能，不利于机体健康口3〕。双歧杆菌是肠道常见有益菌，可通过竞争作用抑制肠道病原菌的生长、繁殖，维持肠道正常功能，保护机体免疫力。本研究显示，自闭症患儿肠道双歧杆菌数量明显低于健康儿童，且随着自闭症患儿病情分级增加，双歧杆菌数量降低明显。Spearman分析显示，自闭症患儿肠道双歧杆菌数量与自闭症分级呈负相关，可知双歧杆菌数量越低患儿病情越严重，其原因可能与肠道内双歧杆菌水平降低，对致病菌的抑制作用减弱，无法有效维持患儿肠道微生态稳定有关。梭状芽抱杆菌是能形成芽抱的革兰阳性厌氧菌，梭状芽抱杆菌可产生甲酚、丙酸等神经毒性物质。有研究发现EL自闭症患儿肠道内梭状芽抱杆菌数量明显高于健康儿童。本研究也显示自闭症分级越高患儿肠道内梭状芽泡杆菌数量越高。拟杆菌和大肠埃希菌是肠道内常见致病菌，在肠道微生态平衡失调时呈竞争生长，可引起内源性感染，破坏机体免疫、代谢功能。临床研究显示大脑与肠道间可通过脑一肠轴产生双向作用，在中枢神经系统中对机体认知、情感、行为产生影响。拟杆菌和大肠埃希菌等水平改变可能引起肠道内相关物质代谢改变，进而影响肠道黏膜通透性，导致相关代谢产物进入血液，影响中枢系统功能。

总结

Spearman分析显示，拟杆菌和大肠埃希菌与自闭症患儿病情分级呈正相关。志贺菌是人类细菌性痢疾的病原菌，有研究发现其水平可能影响孤独症患者行为。本研究显示，志贺菌与自闭症患儿病情分级呈正相关。因此患儿自闭症的发生、发展与肠道菌群分布具有明显相关性。故本研究认为自闭症患儿胃肠道疾病症状发生率较高，肠道菌群紊乱与自闭症的发生、发展具有明显相关性。建议临床治疗时应注意自闭症患儿肠道菌群调节，改善自闭症患儿预后。

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